تتبع لعبة Assassin’s Creed Brotherhood قصة Ezio Auditore da Firenze في ذروة قوته كمعلم أساسنز، حيث يواصل صراعه ضد Templar Order في مدينة Rome خلال عصر النهضة. بعد مواجهته لعائلة بورجيا، يسعى إيزيو لتفكيك سيطرتهم على المدينة التي تغرق في الفساد والجشع. تركز القصة على تطوره كقائد، حيث يعيد بناء أخوية الأساسنز ويقودهم في هجمات منسقة. يقوم اللاعبون بتجنيد الحلفاء وتدريبهم وإحياء أحياء روما وإلهام السكان للتمرد. تمزج اللعبة بين التخفي والقتال والاستراتيجية، مع أدوات متنوعة للاغتيالات. كما تقدم طور لعب جماعي تنافسي بشخصيات وأساليب فريدة. إنها قصة عن القيادة والوحدة ومقاومة الطغيان.